诺丽酵素:27 种活性成分解锁抗氧化与健康新潜能 —— 基于浙江工业大学专项研究成果
诺丽酵素:27 种活性成分解锁抗氧化与健康新潜能 —— 基于浙江工业大学专项研究成果
导语
一、文献引用
论文基本信息
题目:诺丽酵素的化学成分及生物活性研究(STUDY ON THE CHEMICAL CONSTITUENTS AND BIOLOGICAL ACTIVITIES OF NONI ENZYME)
作者:陆雨(指导教师:王平教授)
单位:浙江工业大学药学院
学科专业:药学(全日制学术研究生)
日期:2018 年
出处:浙江工业大学硕士学位论文
摘要
通过多种色谱技术从诺丽酵素中鉴定得到 27 个化合物,分别为 xylogranatinin (1)、天竺葵酸 (2)、1,5,15-Tri-O-methylmorindol (3)、1,5,7 - 三羟基 - 6 - 甲氧基 - 2 - 甲氧基蒽醌 (4)、Sesquipinsapol B (5)、(+)- 丁香脂素 (6)、松脂素 (7)、3 - 苯甲酸 - 6 - 异丁基 - 哌嗪 - 2,5 - 二酮 (8)、Bungein A (9)、3 - 甲基 - 吡咯并哌嗪 - 1,4 - 二酮 (10)、2 (S)-3′hydroxybutan-2′-yl-2-hydroxypropanoate (11)、3 - 羟基 - 3 - 甲基 - 2 - 羟基丁基丙酸酯 (12)、3 - 异丁基 - 6 - 甲基哌嗪 - 2,5 - 二酮 (13)、3 - 异丁基吡咯并哌嗪 - 1,4 - 二酮 (14)、吐叶醇 (15)、Cyclo-(Ala-Val)(16)、乳酸 (17)、东莨菪亭 (18)、3-(2 - 羟基 - 4,5 - 二甲氧基苯基) 丙酸 (19)、2 - 呋喃甲酸 (20)、2,4,5 - 三羟基苯丙酸甲酯 (21)、对羟基苯甲酸 (22)、3 - 甲氧基 - 4 - 羟基苯甲酸 (23)、龙胆酸 (24)、medioresinol (25)、hydroxychavicol (26)、3′-hydroxybutan-2′-yl-2-hydroxypropanoate (27)。除化合物 18、22、24 外,其余化合物均为首次从诺丽酵素中发现。实验研究了化合物 1~8、10~15、17~27 对人胃癌细胞 MGC-803 的抑制作用,结果显示其抑制作用较弱。
采用自然发酵及添加酵母菌、黑曲霉菌、乳酸菌、酵红素等菌种发酵制备五种诺丽酵素。通过成分分析发现,自然发酵的诺丽酵素中东莨菪亭、龙胆酸、咖啡酸、芥子酸、槲皮素、总多酚(10.03mg/mL)和总多糖(44.57mg/mL)含量均高于其它四种酵素;五种酵素中对香豆酸(5.16~5.63μg/mL)、阿魏酸(3.31~5.72μg/mL)、可溶性蛋白及总黄酮含量差异较小,pH 均在 3.50~4.0 之间。
抗氧化活性研究表明,自然发酵的诺丽酵素总还原能力及 DPPH 自由基清除率(稀释 50 倍时超 90%)高于其它四种酵素;五种酵素羟自由基与超氧阴离子自由基清除能力差异较小。SPSS 分析显示,抗氧化主要物质来源为多糖及酚类化合物,其中东莨菪亭、槲皮素、龙胆酸及咖啡酸起关键作用。此外,诺丽酵素具有一定酪氨酸酶抑制活性(黑曲霉菌发酵组抑制能力较强)及抑制细胞迁移能力(自然发酵组对 HCT116 细胞迁移率仅 3.86%±1.81%,对照组 29.51%±3.79%),且该活性与抗氧化活性无相关性。
关键词
二、研究成果深度解析
(一)27 种活性成分精准鉴定,24 种为首次发现
关键活性化合物及含量特征:
东莨菪亭(化合物 18):自然发酵组含量最高,达 100.00μg/mL,酵母菌发酵组仅 42.89μg/mL,是抗氧化核心成分之一;
龙胆酸(化合物 24):自然发酵组 19.29μg/mL,酵母菌发酵组未检出,对总还原能力贡献显著(相关系数 R=0.973,P<0.01);
咖啡酸(化合物组关键成分):自然发酵组 5.01μg/mL,是酚类化合物中抗氧化活性的重要载体(与 DPPH 自由基清除率相关系数 R=0.893,P<0.05);
槲皮素(化合物组关键成分):自然发酵组 11.81μg/mL,酵母菌发酵组 6.18μg/mL,与 DPPH 自由基清除率呈极显著相关(R=0.984,P<0.01)。
细胞抑制活性数据:
对分离出的 25 种化合物(除化合物 9、16 外)进行人胃癌细胞 MGC-803 抑制作用测试,结果显示:阳性对照(顺铂)抑制率达 71.85%±0.80,而诺丽酵素化合物最高抑制率仅为 39.64%±0.68(1,5,15-Tri-O-methylmorindol),且仅 3 种化合物抑制率超 30%,8 种化合物无抑制作用,表明诺丽酵素对胃癌细胞的直接抑制作用较弱,其健康价值更多体现在抗氧化、抗炎等基础防护功能。
(二)发酵方式决定成分差异,自然发酵优势显著
优势成分富集工艺:
抗氧化相关成分:自然发酵组总多酚 10.03mg/mL,是酵母菌发酵组(约 5.2mg/mL)的 1.9 倍;总多糖 44.57mg/mL,是酵母菌发酵组(18.21mg/mL)的 2.5 倍,差异源于酵母菌无氧发酵会分解糖类生成酒精,导致多糖流失;
特定活性成分:芥子酸(自然发酵 2.78μg/mL vs 酵母菌 0.26μg/mL)、咖啡酸(自然发酵 5.01μg/mL vs 酵母菌 0.94μg/mL)均在自然发酵中富集,而酵母菌发酵会显著降低此类酚酸含量。
成分稳定性特征:
五种发酵方式下,对香豆酸(5.16~5.63μg/mL)、阿魏酸(3.31~5.72μg/mL)含量波动较小,可溶性蛋白含量均较低(因发酵酸性增强导致蛋白水解为多肽 / 氨基酸),pH 均低于诺丽鲜果(鲜果 pH4.38),表明发酵过程中有机酸(如乳酸、天竺葵酸)生成稳定,可保证产品保质期与口感一致性。
(三)生物活性多维度验证,健康价值有数据支撑
抗氧化活性:
DPPH 自由基清除率:自然发酵组稀释 50 倍时达 90% 以上,菌种发酵组仅 50% 左右,稀释倍数增大后差异更显著;
总还原能力:自然发酵组吸光度(700nm)是酵母菌发酵组的 1.6 倍,与总多酚、总多糖含量呈极显著相关(R 分别为 0.986、0.995,P<0.01);
羟自由基 / 超氧阴离子自由基清除率:五种发酵组差异较小,稀释 25 倍时清除率均维持在 60%~70%,表明诺丽酵素对这类自由基的清除具有普适性。
美白活性(酪氨酸酶抑制):
黑曲霉菌发酵组酪氨酸酶抑制率最高(相对空白组降低 35%),自然发酵、酵母菌及酵红素发酵组抑制率相近(约 28%~30%),乳酸菌发酵组最弱(约 22%),但均低于阳性对照熊果苷(同浓度下抑制率 45%),为诺丽酵素在护肤品领域的应用提供了方向。抑制细胞迁移活性:
划痕实验显示,自然发酵组对 HCT116 结肠癌细胞与 MCF7 乳腺癌细胞迁移抑制能力最强:HCT116 细胞:自然发酵组迁移率 3.86%±1.81%,黑曲霉菌发酵组 25.13%±4.45%(与对照组无显著差异);
MCF7 细胞:自然发酵组迁移率 2.14%±1.41%,乳酸菌发酵组 22.30%±1.25%(与对照组无显著差异),表明自然发酵可增强诺丽酵素对特定癌细胞迁移的抑制作用,且该作用具有细胞选择性。
三、市场价值和应用前景
(一)保健产品领域:抗氧化与基础健康防护
核心价值点:自然发酵诺丽酵素富含多糖(44.57mg/mL)与酚类化合物(总多酚 10.03mg/mL),可通过清除自由基减少氧化应激对细胞的损伤,适合以下人群:
久坐办公、作息不规律导致的 “亚健康氧化状态” 人群:每日摄入自然发酵诺丽酵素,可辅助提升机体抗氧化能力(DPPH 清除率超 90% 的数据支撑);
中老年人:东莨菪亭、槲皮素等成分可辅助维护细胞健康,研究显示此类酚类成分能减少自由基对血管、皮肤的老化影响。
产品开发方向:可开发 “高多酚诺丽酵素原液”(主打自然发酵工艺),标注核心成分含量(如东莨菪亭≥80μg/mL、总多酚≥8mg/mL),通过数据化标签建立市场信任。
(二)功能性食品领域:肠道健康与代谢辅助
核心价值点:
发酵过程生成的乳酸(化合物 17)、有机酸类成分可调节肠道 pH(产品 pH3.50~4.0),辅助抑制有害菌生长;
可溶性蛋白水解生成的多肽与氨基酸,可作为肠道易吸收的营养补充,且五种发酵方式下蛋白含量稳定,适合开发标准化产品。
产品开发方向:推出 “诺丽酵素益生菌复合饮品”,复配乳酸菌(研究中乳酸菌发酵组总黄酮含量稳定),同时标注 pH 值与有机酸含量,针对肠道功能较弱人群提供精准营养支持。
(三)护肤品领域:天然美白与肌肤防护
核心价值点:诺丽酵素具有酪氨酸酶抑制活性(黑曲霉菌发酵组最优),且含 2 - 呋喃甲酸(化合物 20)、对羟基苯甲酸(化合物 22)等具有抗炎、舒缓作用的成分,可减少黑色素生成同时保护肌肤屏障,避免化学美白成分的刺激。
产品开发方向:开发 “诺丽酵素美白精华液”,选用黑曲霉菌发酵原料(酪氨酸酶抑制率最高),复配龙胆酸(抗炎辅助),通过 “抑制黑色素 + 抗氧化 + 抗炎” 三重机制,满足敏感肌美白需求,且可标注 “无化学防腐剂”(产品自身酸性环境可抑制微生物生长)。
(四)市场差异化优势:发酵工艺成为品质标杆
消费者端:通过 “自然发酵 1 年”“东莨菪亭含量≥90μg/mL” 等数据标签,区分普通菌种发酵产品,解决市场 “概念炒作” 问题;
产业端:为诺丽酵素制定 “成分含量标准” 提供依据,如建议将自然发酵产品的总多酚≥8mg/mL、总多糖≥40mg/mL 作为优质产品指标,推动行业规范化发展。
四、结语
参考文献
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