无籽革新 + 60 + 营养加持！诺丽基因转化研究解锁健康食品新赛道
无籽革新 + 60 + 营养加持！诺丽基因转化研究解锁健康食品新赛道
导语
随着健康消费升级，天然高营养食品成为市场刚需，诺丽作为含 60 多种营养成分的 “超级水果”，其深加工产品（酵素、复合果汁等）备受青睐。但成熟诺丽果实含百粒种子、汁液粘稠，出汁率低的问题，严重制约了产业发展。为破解这一痛点，西南林业大学科研团队开展以诺丽茎段为外植体的无籽基因转化研究，通过根癌农杆菌介导法成功导入无籽基因，不仅为无籽诺丽培育奠定基础，更让诺丽的营养价值得以高效释放，为健康食品市场注入新活力。
一、文献引用
题目：以诺丽茎段为外植体的无籽基因转化研究
作者：贾丹丹 1，蓝增全 2，吴田 1
单位：1.西南林业大学园林学院／国家林业局风景园林工程技术研究中心，昆明 650224；2. 西南绿色发展研究院，昆明 650224
摘要：以诺丽无菌苗不带腋芽的茎段为转化材料，采用根癌农杆菌介导法，将含有无籽基因的质粒 pCAMBIA1305.1 导入到诺丽细胞中，通过 Kan 快速筛选、PCR 检测等方法对转化子进行鉴定。实验结果表明：抗性芽的平均分化频率为 42％，经过 PCR 检测，以茎为外植体进行遗传转化的转化率为 5.4％。在转化过程中，有些植株可能会发生饰变。该实验初步证实已把无籽基因转入诺丽，后续需 Southern 杂交进一步验证。
关键字：海巴戟；茎段；农杆菌；转基因
日期：2018年
出处：西南大学学报（自然科学版），2018 年 9 月，第 40 卷第 9 期，
DOI：10．13718／j．cnki．xdzk．2018．09．002
二、研究成果深度解析
（一）诺丽核心营养成分：天然健康的 “营养宝库”
诺丽（学名海巴戟）属茜草科巴戟天属植物，在我国台湾、海南岛、云南西双版纳等地均有分布，其果实被誉为 “天然营养宝库”，含 60 多种关键营养成分，核心价值成分及功效如下：
赛洛宁：诺丽中最珍贵的营养成分，具有促进细胞再生、改善体质、提升睡眠质量、恢复身体活动能力的核心功效，是诺丽健康价值的核心支撑。 抗氧化活性成分：实验证实诺丽鲜果具有显著清除 DPPH 自由基的能力，其果汁可降低老龄老鼠肝组织中 SOD（超氧化物歧化酶）、GSH－Px（谷胱甘肽过氧化物酶）的活力，同时降低血中过氧化脂质 MDA（丙二醛）含量，体现出强大的抗氧化、抗衰潜力。
（二）无籽基因转化关键成果：数据支撑的技术突破
研究团队以诺丽无菌苗不带腋芽的茎段为外植体，采用根癌农杆菌介导法完成无籽基因转化，核心实验数据与成果如下：
外植体：诺丽无菌组培苗茎段（不带腋芽），继代培养基为 MS＋0．2 mg／L NAA，继代周期 90 天左右，转化前需继代 60 天并切成 2mm 左右薄片。 农杆菌与质粒：选用 EHA105 农杆菌菌株，携带无籽基因的质粒 pCAMBIA1305.1，含标记基因 NptII 及 GUS 基因。 农杆菌培养条件：在含 50mg／L Rif、50mg／L Kan、100μmol／L AS 的 YEB 培养基中培养，28℃、200r／min 摇床培养，亚培养 8h 时 OD 值达 0.5，为最佳侵染浓度。 转化流程：预培养 3 天→农杆菌侵染 30 分钟→共培养 3 天（MS＋100μmol／L AS 培养基）→无菌水冲洗 5-8 次→200mg／L Cef 浸泡 20 分钟→筛选培养（MS＋1．0 mg／L 6－BA＋0．05 mg／L NAA＋15 mg／L Kan＋200 mg／L Cef）。
抗性芽分化率：外植体在筛选培养基上 25 天左右分化出愈伤组织，40 天左右分化出抗性芽，经 8 批次实验（每批次接种 50 个外植体，总计 400 个），最终分化抗性芽 168 个，平均分化频率达 42％（标准差 ±3．16）。 转化子筛选结果：通过 Kan 培养基进一步筛选，排除 64 株白化苗和 34 株农杆菌污染植株，最终获得 70 株转化子。 转化率：对 70 株转化子进行 PCR 检测，引物为 NptIIF（5′－gct atg act ggg cac aac ag－3′）和 NptIIR（5′－ata ccg taa agc acg agg aa－3′），反应体系 20μL，经 35 个循环扩增后，检测到 9 株阳性转化子，转化率为 5．4％。 分子验证：PCR 扩增产物经 1％琼脂糖凝胶电泳检测，获得 750bp 特异性条带，测序结果证实为目的基因 NptII 片段，初步确认无籽基因已转入诺丽细胞。
三、市场价值和应用前景
（一）市场价值：营养优势与技术突破双重赋能
营养健康价值：诺丽的核心营养成分直接对接市场健康需求
细胞再生与体质改善：赛洛宁成分针对现代人群久坐、熬夜导致的体质下降，可促进细胞修复，提升身体机能，适配亚健康调理市场。 抗氧化抗衰：清除 DPPH 自由基、降低 MDA 含量的功效，契合消费者对天然抗衰产品的需求，避免化学抗衰成分的潜在风险。 睡眠改善：赛洛宁对睡眠的调节作用，精准匹配失眠、睡眠质量差等人群需求，市场受众广泛。
产业生产价值：无籽技术破解产业痛点
提升出汁率：诺丽果实含百粒种子是出汁难的核心原因，无籽基因转化成功后，果实出汁率将大幅提升，降低生产能耗与成本。 优化产品形态：解决汁液粘稠问题，可开发纯度更高、口感更好的诺丽果汁、酵素等产品，提升产品竞争力。 规模化种植潜力：无籽诺丽的培育将推动标准化种植，为深加工产业提供稳定原料供应，助力产业规模化发展。
（二）应用前景：多领域拓展的健康产业新蓝海
食品饮料领域：打造高营养便捷产品
无籽诺丽纯果汁：出汁率提升后，可生产无添加纯果汁，保留全部营养成分，满足追求天然健康饮品的消费群体需求。 复合酵素：以无籽诺丽为核心原料，搭配益生菌发酵，开发功效更集中的酵素产品，覆盖肠道调理、美容养颜等细分场景。 营养代餐：将诺丽提取物与谷物、蛋白结合，开发便携代餐粉、代餐棒，适配健身、减脂人群的营养补充需求。
保健品领域：聚焦精准健康调理
赛洛宁提取物胶囊：提纯诺丽中的赛洛宁成分，制成高浓度保健品，针对细胞修复、睡眠改善等精准需求，提供高效解决方案。 抗氧化膳食补充剂：以诺丽抗氧化成分为核心，开发延缓衰老、保护心血管的膳食补充剂，对接中老年人健康市场。
产业延伸前景：技术平台带动全产业链发展
基因工程拓展：该研究建立的诺丽转基因平台，为后续其他功能基因（如增强抗氧化、提升营养成分含量等）的导入奠定基础，持续优化产品性能。 种植与深加工协同：无籽诺丽的规模化种植将带动产地经济，形成 “种植－采摘－深加工－销售” 的完整产业链，创造就业与经济价值。 市场全球化：诺丽原产于热带地区，我国已实现本土化种植，无籽技术的突破将提升国产诺丽产品的国际竞争力，拓展海外市场。
四、结语
西南林业大学团队开展的诺丽无籽基因转化研究，不仅实现了无籽基因的成功导入（转化率 5.4%、抗性芽分化率 42%），破解了诺丽产业出汁率低的核心痛点，更让其含有的 60 多种营养成分（尤其是珍贵的赛洛宁）得以高效转化为市场价值。诺丽的营养优势与无籽技术的结合，既满足了消费者对天然健康产品的刚需，又为产业规模化、高品质发展提供了技术支撑。随着后续 Southern 杂交验证的推进与转化体系的优化，无籽诺丽有望成为健康食品市场的核心品类，带动从种植到深加工的全产业链升级，为健康中国战略注入新的产业动力。
参考文献
［1］贾丹丹，蓝增全，吴田．以诺丽茎段为外植体的无籽基因转化研究［J］．西南大学学报（自然科学版），2018，40（9）：7－12．
［2］吴田，蓝增全．诺丽离体培养研究［J］．山东农业大学学报（自然科学版），2011，42（2）：179－182．
［3］潘晓晴，吴田，蓝增全，等．诺丽茎段的离体再生［J］．东北林业大学学报，2014，42（8）：20－24．
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