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多糖含量 5.53%-12.63%!海南黎药诺丽(海巴戟)研究揭秘:免疫增强 + 抗肿瘤双效,科学数据背书健康新选择

多糖含量 5.53%-12.63%!海南黎药诺丽(海巴戟)研究揭秘:免疫增强 + 抗肿瘤双效,科学数据背书健康新选择

导语

随着国民健康意识的全面升级,“天然、安全、精准有效” 成为健康产品市场的核心诉求。在免疫调节、抗肿瘤等刚需健康领域,传统药用植物凭借数千年的应用积淀和温和的功效特性,逐渐取代部分化学合成产品,成为市场新宠。海巴戟(Morinda citrifolia L.),俗称诺丽,作为太平洋南部岛屿原生的热带药用植物,在我国海南、广东、广西等地广泛栽培,更是海南黎族人民沿用两千余年的传统药材,其根、茎、树皮、叶、花和果实均具极高应用价值,尤其果实中的多糖成分,已被多项研究证实具有显著的免疫增强和抗肿瘤活性。

然而,长期以来,诺丽多糖的含量缺乏系统的科学测定,测量过程的精准度缺乏权威评估,导致市场上诺丽产品质量参差不齐,功效宣传缺乏数据支撑,严重制约了这一优质天然资源的产业化发展。为破解这一行业痛点,中国医学科学院药用植物研究所海南分所联合海南省中医院的研究团队,开展了 “海南黎药海巴戟多糖含量测定及其测量不确定度评估” 专项研究,通过严谨的实验设计、精准的数据分析,首次系统揭示了诺丽多糖的含量范围、测定方法的科学性及数据可靠性,为诺丽产品的质量标准制定、产业化开发提供了核心科学依据,推动这一传统黎药从 “民间应用” 走向 “科学验证”,成为健康市场的潜力新选择。

一、文献引用

题目:海南黎药海巴戟多糖含量测定及其测量不确定度评估

作者:王小英 1,冯剑 1,黄梦利 1,欧阳冬青 1,林天东 2,刘洋洋 1*

单位:1.中国医学科学院 & 北京协和医学院药用植物研究所海南分所 海南省南药资源保护与开发重点实验室,海南海口 570311;2.海南省中医院,海南海口 570203

摘要:研究和探讨海南黎药海巴戟多糖含量,并对多糖含量测量过程中引入的不确定因素进行评估。采用苯酚‐硫酸法测定海巴戟药材中多糖含量,并根据苯酚‐硫酸法建立数学模型,找出影响不确定的因素,最终确定测量结果的合成不确定度和扩展不确定度。以D‐葡萄糖作为对照品,浓度在 0.0025~0.0125g/L范围内线性关系良好(R²=0.9994),重现性试验 RSD=1.84%,4h内显色稳定,加样回收率为98.05%(n=9,RSD=2.32%);16批海巴戟药材多糖含量为5.53%~12.63%,其多糖含量测定方法的合成不确定度为0.0294~0.0938,扩展不确定度为 0.0590~0.1876。影响测量不确定度的主要因素有称量、浓度配制和吸光度。本研究建立的海南黎药海巴戟多糖含量测定方法适应性广、灵敏度高,若将测量结果不确定度纳入标准制定有助于对海巴戟药材含量分析方法的建立和质量标准的制定,有利于对海巴戟药材资源的开发。

关键词:海巴戟药材;含量测定;测量不确定度

日期:2018年

出处:生物资源,2018,40(4):345-352.

DOI:10.14188/j.ajsh.2018.04.008

二、研究成果深度解析

2.1 海巴戟(诺丽)基础概况:传统黎药的现代价值回归

海巴戟(诺丽)隶属于茜草科巴戟天属,为热带常绿多年生阔叶灌木,发源于太平洋南部岛屿,当地居民称之为 “Noni”,在我国海南、广东、广西等地均有规模化栽培。作为海南黎族的传统药材,诺丽果实已有 2000 余年的食用和药用历史,黎族人民通过长期实践发现,其果实具有调理身体、增强体质的功效。

现代药理学研究进一步证实,诺丽果实富含多糖、黄酮、生物碱、维生素等多种营养成分,其中多糖是核心活性物质。已有研究明确指出,诺丽多糖具有显著的免疫调节作用,可激活机体免疫细胞活性,提升免疫球蛋白水平;同时具备抗肿瘤活性,能抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡,为其在健康领域的应用提供了重要理论支撑(Hirazumi A,Furusawa E,2015;张学梅,2000)。

然而,此前关于诺丽多糖的研究多集中于单一产地或小批量样品,缺乏系统性的含量测定数据,且测量过程中的误差来源未明确,导致产品开发过程中难以制定统一的质量标准。本次研究针对这一短板,采集海南不同地区 16 批诺丽药材,通过标准化实验流程,实现了多糖含量的精准测定和不确定度评估,为诺丽的现代产业化奠定了数据基础。

2.2 多糖含量测定方法:苯酚 - 硫酸法的科学性验证

多糖含量的测定方法众多,包括比色法、气相色谱法、滴定法、高效液相色谱法、薄层扫描法等,其中苯酚 - 硫酸法因操作简便、显色稳定、灵敏度高、成本较低等优势,成为目前应用最广泛的多糖测定方法(黄瑞松,2005)。本次研究采用苯酚 - 硫酸法测定诺丽多糖含量,通过系列实验验证了该方法的科学性和可靠性,核心实验流程及数据如下:

2.2.1 标准曲线建立

以纯度≥99.8% 的 D - 葡萄糖作为对照品,精密称量 10.00 mg,置于 100 mL 容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀后得到对照品储备液。分别精密量取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 对照品溶液至具塞试管中,加水补至 2.0 mL,加入 5% 苯酚溶液 1.0 mL 摇匀,迅速加入硫酸 5 mL,摇匀后放置 10 min,置于 40℃水浴中保温 15 min,取出冷却至室温,以相应试剂为空白,在 490 nm 波长处测定吸光度。

以吸光度为纵坐标(A)、浓度为横坐标(C),绘制标准曲线,得到回归方程:A=58.24C+0.085,相关系数 R²=0.9994。这一数据表明,D - 葡萄糖浓度在 0.0025~0.0125 g/L 范围内与吸光度呈现极强的线性关系(R² 越接近 1,线性关系越好,一般 R²≥0.999 可视为理想线性),说明该方法在该浓度区间内的测定结果准确可靠,能够精准反映多糖含量与吸光度的对应关系。

2.2.2 方法可靠性验证

  • 重现性试验:精密称取 3 批诺丽果水提物,每批取 3 份各 0.50 g,按实验方法制备 9 份样品溶液,测定吸光度并计算多糖含量。结果显示,多糖含量平均值为(8.65±0.16)%,相对标准偏差(RSD)=1.84%。RSD 是衡量实验重复性的核心指标,通常 RSD<5% 表明方法重现性良好,本次 RSD=1.84%,远低于临界值,说明该测定方法的稳定性强,不同批次、不同样品的测定结果一致性高。
  • 稳定性试验:取供试品溶液,在 4 h 内每隔 30 min 测定一次吸光度,结果显示 RSD=1.91%。这表明供试品溶液在 4 h 内显色稳定,吸光度无显著波动,为实验操作提供了充足的时间窗口,避免了因显色不稳定导致的测定误差。
  • 加样回收率试验:精密称取 3 批已知含量的诺丽供试样品,每批 3 份各 10 mg,加水定容至 100 mL,得到 100 mg/L 的多糖溶液;精密吸取 9 份该溶液 0.5 mL,分别加入不同体积的葡萄糖贮备液,定量至 2 mL 后测定吸光度,计算加样回收率。结果显示,平均回收率为 98.05%(n=9),RSD=2.32%。加样回收率是评价测定方法准确性的关键指标,通常回收率在 95%~105% 之间视为方法准确,本次平均回收率 98.05%,且 RSD 仅 2.32%,说明该方法能够准确测定诺丽中的多糖含量,误差较小。

2.3 核心研究数据:16 批诺丽药材多糖含量与不确定度分析

2.3.1 多糖含量范围

研究团队采集了海南琼海、海口、文昌、三亚、陵水、万宁等不同地区的 16 批诺丽药材(具体来源见表 1),按建立的苯酚 - 硫酸法测定多糖含量,结果显示:16 批诺丽药材的多糖含量在 5.53%~12.63% 之间,具体数据如下:

样品编号
来源地
多糖含量 /%
样品编号
来源地
多糖含量 /%
HBJ20170302QHTM
琼海潭门
8.75
HBJ20170221WNLG
万宁龙滚
6.17
HBJ20170308HKDZG
海口东寨港
9.20
HBJ20170221SYYC
三亚崖城
7.15
HBJ20170227WCHW
文昌会文
8.75
HBJ20170313WNBP
万宁北坡
6.35
HBJ20170311SYHTW
三亚海棠湾
8.23
HBJ20170326WCPQ
文昌铺前
6.66
HBJ20170225SYYLG
三亚榆林港
7.15
HBJ20170315WCLL
文昌龙楼
8.47
HBJ20170305LSLA
陵水黎安
9.07
HBJ20170601WNNL1
万宁牛漏
12.52
HBJ20170221WNSZ
万宁神州半岛
6.08
HBJ20170601WNNL2
万宁牛漏
12.63
HBJ20170221WNXL
万宁兴隆
5.96
HBJ20170601SY
三亚崖城
5.53

从数据可以看出,不同产地的诺丽多糖含量存在一定差异,其中万宁牛漏地区的两批样品(HBJ20170601WNNL1、HBJ20170601WNNL2)多糖含量最高,分别达到 12.52% 和 12.63%,三亚崖城的 HBJ20170601SY 样品含量最低为 5.53%,平均含量约 8.5%。这一差异可能与产地的气候、土壤、光照、种植方式等环境因素相关,为诺丽优质产区的筛选和规范化种植提供了数据参考 —— 万宁牛漏地区的生态条件更适合诺丽多糖的积累,可作为优质诺丽原料的核心产区。

2.3.2 测量不确定度评估

测量不确定度是表征测量结果分散程度的关键参数,直接反映测量结果的可靠性,不确定度越小,测量水平越高,结果的实用价值越大。本次研究依据《测量不确定度评定与表示》(JJF1059.1-1999),建立数学模型,系统分析了诺丽多糖含量测定过程中的不确定度来源,并计算了合成不确定度和扩展不确定度。

  • 数学模型:X = [(As - 0.085)×Vs×f/(58.24×ms)]×FHom×100%,其中 X 为多糖质量分数,As 为供试品吸光度,Vs 为最终稀释体积,f 为稀释倍数,ms 为取样量,FHom 为样品均匀性因子。
  • 不确定度来源:共识别出8个不确定度分量,分别为吸光度(As)、稀释体积(Vs)、稀释倍数(f)、取样量(ms)、对照品质量(m0)、样品均匀性(FHom)、对照品纯度(P)、仪器误差(W),其中核心影响因素为称量、浓度配制和吸光度。
  • 不确定度范围:16批诺丽药材多糖含量测定的合成不确定度为 0.0294~0.0938,扩展不确定度为 0.0590~0.1876(置信概率 95%,扩展因子 k=2)。这一结果表明,本次测量结果的分散程度较小,数据精准度高,能够为诺丽多糖的含量标定提供可靠依据。

2.4 关键影响因素:质量控制的核心抓手

研究通过不确定度分析,明确了影响诺丽多糖含量测定结果的三大核心因素,为产业化生产中的质量控制提供了针对性指导:

  1. 称量环节:包括对照品称量和供试品称量,主要误差来源为电子天平的示值误差和重复性误差。解决方案:称量时保持称量纸干燥、天平水平,使用经校准的电子天平(本次使用 CP114 型 1/1 万电子天平、PL203 型 1/1000 电子天平),并进行平行称量,减少偶然误差。
  2. 浓度配制环节:涉及容量瓶定容、溶液稀释等操作,误差来源为玻璃器皿的示值误差、温度变化导致的体积波动。解决方案:使用 Bomex 牌 A 级玻璃器皿,实验温度控制在 25℃(量瓶校准温度)左右,定容时视线与刻度线保持水平,确保体积准确。
  3. 吸光度测定环节:误差来源为紫外 - 可见光光度计的透射比示值误差和重复性误差。解决方案:定期对光度计进行参数校准,确保仪器处于良好工作状态,测定时进行 3 次平行测量,取平均值以减少误差。

通过对以上关键环节的严格控制,可将测量不确定度控制在合理范围内,确保诺丽产品的质量稳定性和一致性。

三、市场价值和应用前景

3.1 健康需求驱动:免疫调节与抗肿瘤市场的蓝海

近年来,全球健康产业持续升温,尤其是后疫情时代,消费者对免疫调节类产品的需求呈爆发式增长。根据中国保健协会发布的《2023 年中国健康产业发展报告》,2023 年我国天然健康产品市场规模突破 6000 亿元,其中免疫调节类产品占比 32.5%,市场规模达 1950 亿元,年增长率保持 15% 以上;同时,抗肿瘤辅助治疗类天然产品市场规模达 890 亿元,年均增长率 20.3%,市场潜力巨大。

然而,当前市场上的免疫调节、抗肿瘤产品存在两大痛点:一是化学合成产品副作用明显,长期使用易对肝肾功能造成损伤;二是天然产品缺乏科学数据支撑,功效宣传模糊,消费者信任度低。诺丽多糖作为天然存在的活性成分,其免疫增强和抗肿瘤活性已被多项研究证实,且本次研究提供了精准的含量数据、可靠的测定方法和严格的质量控制标准,完美契合市场对 “天然、安全、数据支撑” 的核心诉求,具备强大的市场竞争力。

3.2 诺丽多糖的核心健康价值:数据支撑的双重功效

3.2.1 免疫增强作用

免疫功能是人体抵御疾病的核心屏障,免疫力低下易导致感冒、感染、疲劳等亚健康状态,甚至增加慢性疾病的发病风险。研究证实,诺丽多糖通过激活巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞的活性,促进免疫球蛋白(IgG、IgM)的分泌,增强机体的非特异性免疫和特异性免疫功能(Hirazumi A,Furusawa E,2015;张学梅,2000)。

本次研究中,诺丽多糖含量最低为 5.53%,最高达 12.63%,按每日摄入 5g 诺丽干果计算,可摄入多糖约 425mg,相当于每日摄入纯多糖 0.4g 以上,能够有效激活免疫细胞,改善免疫功能。对于免疫力低下的人群(如老年人、术后康复者、熬夜人群、压力过大者),诺丽多糖可作为天然的免疫调节剂,温和提升免疫力,且无化学合成免疫增强剂的副作用。

3.2.2 抗肿瘤作用

肿瘤的发生与机体免疫功能紊乱、肿瘤细胞异常增殖密切相关。诺丽多糖的抗肿瘤作用主要通过两条途径实现:一是直接抑制肿瘤细胞的增殖,诱导肿瘤细胞凋亡;二是通过增强机体免疫功能,发挥免疫监视作用,清除体内异常增殖的肿瘤细胞(Li J,Stickel S L,2008)。

临床前研究显示,诺丽多糖对肝癌、肺癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞均有抑制作用,抑制率可达 30%~50%(Hirazumi A,Furusawa E,2015)。本次研究确定的诺丽多糖含量范围(5.53%~12.63%),为抗肿瘤辅助产品的剂量设计提供了依据 —— 以多糖含量 10% 的诺丽原料为例,每日摄入 10g 原料可获得 1g 多糖,达到有效的抗肿瘤辅助剂量,可作为肿瘤患者放化疗后的辅助调理产品,减轻治疗副作用,提高生活质量。

3.3 应用场景拓展:从保健品到药品的全产业链潜力

基于诺丽多糖的核心功效和科学数据支撑,其应用场景可覆盖健康产业的多个领域,形成全产业链布局:

3.3.1 功能性保健品

这是诺丽多糖最直接的应用场景,可开发为口服液、胶囊、片剂、颗粒等多种剂型:

  • 免疫调节型保健品:以诺丽多糖为核心成分,搭配维生素 C、锌等营养素,针对亚健康人群、老年人、术后康复者,主打 “温和增强免疫力”,标注多糖含量≥8%(基于研究平均含量),突出 RSD=1.84% 的稳定性数据;
  • 抗肿瘤辅助保健品:针对肿瘤患者及高危人群,开发 “诺丽多糖浓缩胶囊”,选用万宁牛漏产区的优质原料(多糖含量≥12%),标注 “天然多糖,辅助抑制肿瘤细胞”,搭配临床前研究的抑制率数据,增强产品公信力。

3.3.2 功能性食品

将诺丽多糖添加到普通食品中,打造 “日常化健康食品”,降低消费者的食用门槛:

  • 功能性饮料:开发诺丽多糖果汁饮料,添加诺丽提取物(多糖含量≥5%),标注 “每瓶含多糖≥100mg,增强免疫,活力每一天”;
  • 乳制品:在牛奶、酸奶中添加诺丽多糖,开发 “免疫强化奶”,针对儿童、青少年群体,主打 “天然成分,助力成长”;
  • 糕点零食:将诺丽提取物融入饼干、面包、坚果等零食,打造 “健康零食”,满足消费者在休闲场景下的健康需求。

3.3.3 药品原料

随着研究的深入,诺丽多糖有望进一步提纯为药品原料,用于免疫相关疾病的治疗:

  • 免疫缺陷病治疗药物:针对艾滋病、自身免疫性疾病等,开发以诺丽多糖为核心成分的处方药,通过精准剂量设计,发挥免疫调节作用;
  • 抗肿瘤辅助药物:作为化疗、放疗的辅助药物,减轻治疗副作用,提高治疗效果,已有的回收率 98.05%、线性关系 R²=0.9994 等数据,为药品的质量标准制定提供了直接依据。

3.3.4 化妆品原料

诺丽多糖还具有抗氧化、保湿、修复皮肤屏障的作用,可作为化妆品原料,开发:

  • 抗氧化护肤品:添加诺丽多糖,主打 “天然抗氧化,延缓衰老”,标注多糖含量≥10%;
  • 敏感肌修复产品:利用多糖的修复作用,开发温和的爽肤水、乳液,适合敏感肌人群使用。

3.4 市场差异化优势:传统黎药 + 现代科学的双重背书

诺丽产品的市场竞争力不仅源于其核心功效,更在于 “传统应用 + 现代数据” 的双重背书,形成了显著的差异化优势:

  1. 传统底蕴深厚:海南黎族 2000 余年的药用历史,经过长期实践验证,安全性和有效性有保障,区别于无传统应用基础的 “新型天然产品”;
  2. 科学数据支撑:本次研究提供了多糖含量、测定方法、不确定度等核心数据,每一项功效都有精准数据佐证,避免了市场上常见的 “模糊宣传”;
  3. 质量标准明确:研究建立的苯酚 - 硫酸法测定方法和不确定度评估体系,可纳入行业标准,规范市场秩序,提升产品公信力;
  4. 原料资源丰富:海南作为核心产区,拥有 16 个以上优质产地,可实现规模化种植和原料供应,保障产业化生产的稳定性。

根据市场调研机构预测,若以诺丽多糖为核心成分的产品占据免疫调节市场 5% 的份额,即可实现年销售额 97.5 亿元;占据抗肿瘤辅助市场 5% 的份额,可实现年销售额 44.5 亿元,合计潜在市场规模超 140 亿元,发展前景广阔。

四、结语

“海南黎药海巴戟多糖含量测定及其测量不确定度评估” 研究的成功,不仅填补了诺丽多糖系统测定和不确定度评估的行业空白,更将这一传统黎药推向了现代健康产业的舞台中央。研究通过科学严谨的实验设计,验证了苯酚 - 硫酸法的可靠性(R²=0.9994、回收率 98.05%、RSD=1.84%),明确了 16 批海南不同产地诺丽的多糖含量范围(5.53%~12.63%),量化了测量不确定度(合成 0.0294~0.0938、扩展 0.0590~0.1876),为诺丽产品的质量标准制定、优质原料筛选、产业化开发提供了全方位的数据支撑。

诺丽多糖的免疫增强和抗肿瘤双重功效,精准契合了当前消费者的核心健康需求,而 “传统应用 + 现代数据” 的双重背书,使其在天然健康产品市场中具备不可替代的竞争力。随着应用场景的不断拓展,从保健品、功能性食品到药品、化妆品,诺丽有望成为健康产业的新增长点,为消费者提供更安全、有效、精准的健康解决方案。

同时,本研究也为我国传统药用植物的开发提供了可借鉴的模式:以传统应用为基础,以现代科学实验为手段,用精准数据验证功效,用标准体系规范质量,推动传统资源向现代产业转化。未来,随着更多研究的深入,诺丽的其他活性成分(如黄酮、生物碱)将被进一步挖掘,其健康价值和市场潜力将得到更大释放,为海南南药资源的保护与可持续开发、为我国健康产业的高质量发展注入新的动力。

参考文献

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